Magigen CRISPR Cas9蛋白 | spCas9 2000
Magigen CRISPR-Cas9蛋白spCas9是一种 RNA 介导的核酸内切酶，可以催化双链 DNA 的特异位点切割。其识别 PAM（Protospacer Adjacent Motif）序列的 NGG 处，在靶序列的 3 个碱基内进行切割。PAM 序列的 NGG 必须连在基因编辑靶标位点之后，位于与 sgRNA 互补的 DNA 的对链上。
CRISPR-Cas9蛋白与CRISPR/Cas9系统的引导RNA (gRNA)组成部分形成一个非常稳定的核糖核蛋白(RNP)复合物。CRISPR-Cas9 RNP复合物可以在进入细胞后通过核定位信号(NLS)立即定位到细胞核。与mRNA或质粒系统相比，不需要转录和翻译。此外，与其他系统相比，Cas9 RNP复合物可快速从细胞中清除，减少脱靶切割的机会(Kim等，2014)。这种无DNA系统避免了将外源DNA插入基因组的风险，这对于基于基因编辑的疾病治疗非常有用。NLS- cas9 -NLS核酸酶，该酶在蛋白质两端包含一个核定位序列(NLS)，以满足研究人员的所有要求(如体外裂解实验、RNP复合转染和微注射)。
CRISPR Cas9蛋白的结构域。CRISPR Cas9蛋白由六个结构域组成。晶体结构、图示来自PDB文件: 4CMP
【CRISPR Cas9蛋白用途】
CRISPR Cas9a蛋白主要用于CRISPR基因编辑技术，基因治疗，例如基因敲除、敲入、修饰等。
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