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热烈祝贺美格生物“一种可用于胚胎注射制备 敲除小鼠的Cas9蛋白的制备方法”专利获得授权

广州美格生物研发的“一种可用于胚胎注射制备敲除小鼠的Cas9蛋白的制备方法”,经国家知识产权局审查,于2018年11月27日正式授权。本方法将Cas9蛋白序列转化入pET28a-ccdB-CmR载体,再转化至原核表达菌株,经过诱导表达后,收集菌体,经亲和纯化、用超滤管浓缩纯化、透析后即得到纯化的Cas9蛋白。本发明构建了高效的Cas9蛋白原核表达系统,表达得到的Cas9蛋白经体外切割实验证明具有体外活性,可特异切割体外DNA;胚胎注射实验证明纯化的Cas9蛋白具有体内活性,可用于制备基因修饰动物。将Cas9蛋白和体外转录的gRNA通过电转的方法转进目的细胞来实现基因敲除是目前脱靶效率是最低,敲除效率最高的一个方法。


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